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明天启年间，家居苏州的东林党人周顺居官清廉，敢于直言，在苏州老百姓当中有一定影响，遭到阉党的嫉恨。天启六年，阉党派缇骑逮捕周顺昌，并在苏州大索金钱，达一千三百金，因而激起了苏州人民的反抗。数万群众走上街头，表示抗议。

人们开始还只是“夹道执香，哭声干云”。接着“三学诸生”代表百姓说话:“吏部居乡，立朝者盍为请于朝?”缇骑厉声大骂说:“东厂捕人，鼠辈敢尔?”

阉党本以为亮出了东厂的旗号就可以吓倒愤怒的群众，没想到颜佩韦为首的五个义士挺身走在前面，振臂大呼:“吾辈谓天子诏耳，东厂何得逮官?”于是他们率领百姓进行了武力抗争，当场打死了两个缇骑，又打了在姑苏驿另一伙捕人的缇骑，烧了他们的船。

这场斗争震动了阉党首领。随后找了个借口便进行残酷的镇压，五义士被害，周顺昌后来也死在狱中。但是，从此“缇骑不出国门矣”。一年之后，魏忠贤也倒台自杀了。

为了纪念死去的五位烈士，苏州人民把他们合葬在城外虎丘山前面山塘河大堤上，称为“五人之墓”。崇祯元年，张溥写下了《五人墓碑记》。